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微生物李斯特菌检测板
更新时间：2019-01-10
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微生物李斯特菌检测板检测的李斯特菌包括单核细胞增生李斯特菌（Listeria.monocytogenes ），英诺克李斯特菌（Listeria.innocua），威氏李斯特菌（Listeria.welshi），但不能区分各种菌。
| 品牌 | 聚创环保 | 价格区间 | 面议 |
|---|---|---|---|
| 产地类别 | 国产 |
一、微生物李斯特菌检测板产物介绍
1、微生物李斯特菌检测板原理及适用范围
李斯特菌检测板是一种预先制备好的一次性培养基产物，含有标准的营养培养基，选择性试剂，冷水可溶性吸水凝胶和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的显色底物( X-GLU )，适用于检测或者计数食品及环境样品中的李斯特菌菌数。李斯特菌检测板检测的李斯特菌包括单核细胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes )，英诺克李斯特菌(Listeria.innocua)，威氏李斯特菌(Listeria.welshi)，但不能区分各种菌。
2、操作方法
2.1 食品样品检测
2.1.1 食品样品处理：取样品25 g(mL)放入装有225 mL灭菌磷酸盐缓冲液（或生理盐水）的取样罐或均质袋内，制成1:10的样品匀液。根据样品污染程度及检验需要，可进一步制成10倍递增的样品稀释液，选择2～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液）来进行接种。
2.2 环境样品检测
2.2.1 环境样品采集：用无菌的涂抹棒或其他采样设备收集环境样品。湿润采样设备液体体积≤10 mL。湿润剂可以为无菌水，灭菌生理盐水（磷酸盐缓冲液）或者缓冲蛋白胨水。
2.2.2 环境样品处理：在收集的环境样品中添加10 mL 灭菌生理盐水（或磷酸盐缓冲液），充分混匀。根据样品污染程度及检验需要，可进一步制成10倍递增的样品稀释液，选择2～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液）来进行接种。
2.3 接种：将李斯特菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开，用无菌吸管吸取1mL样品匀液均匀滴加到纸片上，迅速贴好上层膜并水平晃动检测板，静置10 s左右，待样品匀液被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。
2.4 培养：将检测板叠在一起，倒置于36℃±1℃恒温培养箱内，培养18～24h。
3、结果判读
在检测板上生长的蓝绿色点即为李斯特菌阳性点，若检测板上无菌生长或者长出点为其他颜色点即为李斯特菌阴性。
4、计数原则及报告方式
4.1 样品计数
4.1.1 以生长有30～300CFU的检测板为计数适宜范围。
4.1.2 若只有一个稀释度检测板上的菌落数在计数合适范围30～300CFU之间，则计算两个检测板菌落数的平均值，再除以相应的稀释倍数，作为每克（毫升）中菌落总数结果。
4.1.3 若有两个连续稀释度在适宜计数范围内时，按式（1）计算：
∑C
N= ———————— •••••••••••••••••••（1）
（n1+0.1n2）d
式中：
狈&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;样品中李斯特菌菌落数；
&蝉耻尘;颁&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;两个连续稀释度检测板（含适宜范围菌落数的检测板）李斯特菌落数之和；
苍1&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;适宜范围菌落数的*个稀释度（低）检测板个数；
苍2&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;适宜范围菌落数的第二个稀释度（高）检测板个数；
诲&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;*稀释度的稀释倍数
示例：
稀释度 | 1:10（*个稀释度） | 1:100（第二个稀释度） |
菌落数 | 245，247 | 31，30 |
（245+247+31+30）
N= ———————— =2514
（2+0.1×2）×10-1
结果表述为2.5&迟颈尘别蝉;103颁贵鲍/驳(尘尝)。
4.1.4 若所有稀释度检测板上均无菌落生长，则以小于1/d（d—*低稀释倍数）计算。
4.1.5 低数值的估算：如果实验样品原液（水及液体饮料）或初始稀释悬液（其他样品）的两个检测板上的菌落数均小于30CFU，计算两个检测板上的菌落数的平均数。计算式（2）：
∑C
NE = —— •••••••••••••••••••（2）
nd
式中：
狈贰&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;每毫升或每克样品中菌数的估算值；
&蝉耻尘;颁&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;两个检测板上菌落数的和；
苍&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;检测板的数量；
诲&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;样品初始悬液或实际接种悬液的稀释倍数。
4.1.6 大数值的估算：若所有稀释度的检测板上菌落数均大于300CFU，计数接近300CFU的检测板上的菌落并计算出平均数，其他检测板可记录为多不可计。结果计算式（3）：
∑C
NE = —— •••••••••••••••••••（3）
nd
式中：
狈贰&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;每毫升或每克样品中菌数的估算值；
&蝉耻尘;颁&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;两个检测板上菌落数之和；
苍&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;检测板的数量；
诲&尘诲补蝉丑;&尘诲补蝉丑;与样品悬液相*的稀释倍数。
5、结果报告
固体样品以颁贵鲍/驳为单位报告，液体样品以颁贵鲍/尘尝为单位报告。
6、附加说明
注意使用过的检测板上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。